Untargeted lipidomics

1 提取

提取方法请参考氧化磷脂

tip

脂质组学复溶用甲醇

2 氧化磷脂组学液质条件

  1. 检测摸式：正、负离子

  2. 质量范围：114-1700 Da

  3. 液相分析条件

  • 色谱柱：Waters ACQUITY Premier HSST3 (2.1×100 mm, 1.8 μm)
  • 柱温：40 ℃
  • 流动相：
    • A相:乙腈:水(1:1)+10 mM甲酸铵+0.01%氨水
    • B相:异丙醇:乙腈(9:1)+10 mM甲酸铵+0.01%氨水
  • 洗脱程序：Table 1
Table 1: 洗脱程序
Time[mins] Flow[ml/min] B% Curve
0.000 0.3 40.0 5
1.000 0.3 40.0 5
8.000 0.3 85.0 5
11.000 0.3 99.0 5
14.000 0.3 99.0 5
14.100 0.3 40.0 5
20.000 0.3 40.0 5
  • 进样量：2 μL(按具体情况调整)
  1. 质谱分析条件

  • 源气参数：

    • 离子源：电喷雾离子化源（ESI）

    • Spray Voltage：正离子, 3.0 kV 负离子, -2.8 kV

    • S-lens RF level：65

    • Capillary temperature：350 ℃

    • Aux gas heater temp：320 ℃

    • 鞘气：30 arb

    • 辅助气：15 arb

    • 反吹气：0 arb

  • 质谱采集参数：请考虑是否需要采集二级。

    • Full MS: Resolution: 70000

    • AGC: 3e6

    • MIT: 100 ms

    • Full MS/dd-MS2: Resolution: 17500

    • AGC: 1e5

    • MIT: 60 ms

    • Top N:6; Isolation window:1.0m/z

    • (N)CE:20, 30, 40

    • dd Settings: Minimum AGC: 1.20e3

    • Intensity thresh: 2.0e4

    • Apex trigger: 2 to 4s

    • Dynamic exclus: 8.0s

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